液相色譜系統(tǒng)是基于物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配差異,實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品分離與分析的精密儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)境、食品等領(lǐng)域,是分離分析有機(jī)化合物和生物大分子的關(guān)鍵工具。
其核心構(gòu)成包括多個(gè)協(xié)同工作的部件。溶劑輸送系統(tǒng)的高壓泵是動(dòng)力核心,能以穩(wěn)定流速和壓力輸送流動(dòng)相,流速精度控制在 ±0.1% 以內(nèi),常規(guī)系統(tǒng)壓力 0-40MPa,超高效系統(tǒng)可達(dá) 100MPa 以上,還具備梯度洗脫功能。進(jìn)樣系統(tǒng)負(fù)責(zé)將微量樣品引入流動(dòng)相,手動(dòng)進(jìn)樣閥適用于少量樣品,自動(dòng)進(jìn)樣器可批量處理,進(jìn)樣精度高且殘留量低。
色譜柱是分離核心,內(nèi)部固定相有硅膠、C18 等。按固定相極性分反相柱和正相柱,按用途分分析柱(直徑 2-5mm)和制備柱(直徑 > 10mm)。固定相粒徑影響分離效率,常規(guī)為 3-5μm,超高效系統(tǒng)可小至 1.7μm 以下。
檢測(cè)器用于捕捉分離后組分信號(hào),紫外 - 可見檢測(cè)器應(yīng)用廣泛;熒光檢測(cè)器靈敏度極高;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器適用于無紫外吸收和熒光的物質(zhì);質(zhì)譜檢測(cè)器兼具高靈敏度和結(jié)構(gòu)解析能力,常與液相聯(lián)用。數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)通過工作站軟件繪制色譜圖,完成定性和定量分析。
分離原理基于分配平衡,樣品進(jìn)入色譜柱后,各組分與固定相、流動(dòng)相的作用力不同,保留時(shí)間各異,按順序流出。反相色譜中,極性強(qiáng)的組分先流出;正相色譜則極性弱的先流出。離子交換色譜分離離子型化合物,體積排阻色譜依分子大小分離。
與氣相色譜相比,液相色譜適用于熱不穩(wěn)定、高沸點(diǎn)和大分子物質(zhì),流動(dòng)相可靈活調(diào)控,操作溫度溫和,應(yīng)用范圍更廣,覆蓋 80% 以上有機(jī)化合物,在各行業(yè)發(fā)揮重要作用。
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