眾所周知，限制光學(xué)顯微鏡的放大倍數(shù)的主要因素是可見(jiàn)光的波長(zhǎng)。為了解決這一問(wèn)題，激光共聚焦顯微鏡問(wèn)世了，但是激光共聚焦顯微鏡仍然尤其局限性。受激光波長(zhǎng)的影響，它的分辨率也只能到達(dá)亞微米級(jí)別。但是越來(lái)越多的領(lǐng)域研究開(kāi)始向著納米級(jí)別進(jìn)發(fā)，這對(duì)于顯微鏡的發(fā)展又是一個(gè)新的挑戰(zhàn)，人們開(kāi)始尋找更小波長(zhǎng)的光來(lái)代替激光，這個(gè)時(shí)候就出現(xiàn)了電子顯微鏡，利用電子束作為光源。但是電子顯微鏡雖然突破了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的分辨率限制，也限制了可觀察的樣品僅限于切片。在生命科學(xué)領(lǐng)域，很多時(shí)候需要用活細(xì)胞或者組織作為觀察樣本。這個(gè)時(shí)候，超分辨顯微鏡開(kāi)始出現(xiàn)在人們的視野中。

　　超分辨顯微鏡是在激光共聚焦顯微鏡的基礎(chǔ)上所拓展的技術(shù)手段。其利用的是受激發(fā)射損耗(STED)技術(shù)。在常規(guī)光學(xué)顯微系統(tǒng)當(dāng)中，由于光學(xué)元件的衍射效應(yīng)，平行入射的照明光經(jīng)過(guò)顯微物鏡聚焦之后在樣品上所成的光斑并不是一個(gè)理想的點(diǎn)，而是一個(gè)具有一定尺寸的衍射斑。在該衍射斑范圍之內(nèi)的樣品均會(huì)由于被照明光照射而發(fā)出熒光，使得該范圍內(nèi)的樣品細(xì)節(jié)信息沒(méi)有辦法被分辨，從而限制了顯微系統(tǒng)的分辨能力。而利用STED顯微技術(shù)，可以有效減小熒光發(fā)光面積。一個(gè)典型的STED顯微系統(tǒng)中需要兩束照明光，其中一束為激發(fā)光，另外一束為損耗光。其主要是通過(guò)引入一束損耗光以受激發(fā)射的方式來(lái)抑制有效熒光的發(fā)射，從而實(shí)現(xiàn)超衍射極限的分辨率。

　　超分辨顯微系統(tǒng)的問(wèn)世，無(wú)疑給生命科學(xué)研究領(lǐng)域帶來(lái)了極大的助力。使得活體樣本內(nèi)的動(dòng)態(tài)成像成為了可能。